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        轉基因元件RuBiSCo啟動子LAMP試劑盒

        轉基因元件RuBiSCo啟動子LAMP試劑盒

        產品時間:2020-08-05

        訪問量:189

        廠商性質:經銷商

        生產地址:進口、國產

        簡要描述:
        轉基因元件RuBiSCo啟動子LAMP試劑盒低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。陽性對照需要因易污染其他成分需要單獨放置。本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供DN段作為陽性對照。
        品牌其他品牌CAS詳見說明書
        分子式詳見說明書純度詳見說明書
        分子量詳見說明書貨號GOYP63870
        規格50次供貨周期現貨
        主要用途公司產品僅用于科研應用領域化工

        儲存條件:
        僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
        1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
        2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
        3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
        4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
        5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

        產品名稱 轉基因元件RuBiSCo啟動子LAMP試劑盒
        英文名稱 Lamp kit for transgenic element Rubisco promoter
        規格 50次

        產品優勢:
        1.隨時可用。
        2.優化的緩沖液可增強特異性并減少引物二聚體的形成。
        3.高靈敏度,特異性和可靠性。
        4.為不同的qPCR儀器提供了被動參考染料。

        使用方法:
        一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)產品僅用于科研
        1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DN段作為陽性對照。
        2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
        3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
        4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
        5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
        6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
        7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

        實驗過程:
        一、試劑準備
        1. DNA模板
        2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
        3.10×PCR Buffer
        4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
        5.Taq酶
        二、操作步驟
        1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
        10×PCR buffer             5μl
        dNTP mixl                 4μl
        引物1(10pM)               2μl
        引物2(10PM)              2μl
        Taq酶(2U/μl)            1μl
        DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
        加ddH2O至               50 μl
        視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
        2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
        3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
        4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
        三、注意事項
        1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。設立一個的PCR實驗室。
        2.純化模板所選用的方法對污染的風險有影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
        3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
        4.PCR試劑配制應使用高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
        5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
        6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
        7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。

        PCR實驗步驟:

        ①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
        ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
        ③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
        ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
        ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
        ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

        L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠瘤細胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C) in mouse lymphoma cells DMEM培養基+10%FBS鹽酸左旋咪唑(標準品)質量規格:UV法含量測定Levamisole HCl

        IL17A Protein Marmoset 重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白米帕明/丙咪嗪質量規格:>99%,BRClomipramine HCL

        人腦膜細胞 (HMC)( 5×105 ) 細胞名稱 NCI-N87 [N87]人胃癌細胞咪唑司汀質量規格:>98.5%,BRMizolastine

        CM-R009大鼠肺大靜脈平滑肌細胞完全培養基100mL嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯質量規格:>99%,BR,可用于細胞培養Mycophenolate Mofetil

        CD3D & CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 嗎替麥考酚酯/霉酚酸酯(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Mycophenolate Mofetil

        CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系普羅布考質量規格:>99%Probucol

        EB病毒轉化的人B細胞;KM933 人髂動脈內皮細胞完全培養基 100mL普羅布考(標準品)質量規格:含量測定Probucol

        胎牛血清FBSIpatasertib(GDC0068)質量規格:>98%,高選擇性的pan-Akt抑制劑GDC-0068;RG7440

        IL21R Others Rat 大鼠 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) L-天冬氨酸鎂質量規格:>98%,BRL-Aspartic acid Mg salt

        人脈絡膜微血管細胞完全培養基 100mL苯并-15-5-(>98.0%(GC))質量規格:>98.0%(GC)Benzo-15-crown 5-Ether

        LRP10 Others Human LRP10 人細胞裂解液 (陽性對照) N-Acetyl-D-tryptophanD-α-N-乙?;?/span>-β-吲哚酸25BR,98%

        小鼠真皮成纖維細胞完全培養基 100mL3--1-炳流醇 98% 3-CHLORO-1-PROPcNqTHIOL 17481-19-2

        HN13口腔鱗狀細胞癌細胞 HN13 oral squamous cell carcinoma cells DMEM+10%FBSMerrifieldresin錄甲基樹脂10BR

        IL23 Protein Human 重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白Calceindiwo7iumsalt鈣黃綠素鈉鹽25IND

        UM-UC-3(人膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×2 HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞321-30-2腺嘌呤鹽;腺素;6-基嘌呤鹽Adenine sulfate

        CXCL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 (His 標簽)尼美舒利Nimesulide質量規格:>99%

        Sf-21(昆蟲細胞) 5×106cells/瓶×2 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硝酸咪康唑Miconazole Nitrate質量規格:>99%

        轉基因元件RuBiSCo啟動子LAMP試劑盒人整合SV40基因的上皮細胞;HBL-100 [HBL100]硝酸咪康唑(標準品)Miconazole Nitrate質量規格:>99%,標準品

        ACVR1C Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸小諾霉素/硫酸小諾米星/硫酸沙加霉素Micronomicin Sulfate質量規格:含量≥590 µg/mg

        人臍血間質干細胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells小諾霉素(標準品)Micronomicin Sulfate質量規格:效價測定

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